新规发布，疫苗杂质分析有难题？ | 岛津分析检测-凯时国际
2024-01-19
图片来源：药监局凯时国际官网
2023年10月12日，国家药监局、国家卫生健康委发布实施《中华人民共和国药典》（2020年版）第一增补本的公告。《公告》指出，《中华人民共和国药典》（2020年版）第一增补本，自2024年3月12日起施行。其中，在三部新增通则和指导原则中发布了“9403 人用疫苗杂质控制技术指导原则”，“人用疫苗杂质控制技术指导原则”公示稿曾于2021年9月在药典委凯时国际官网发布。
该指导原则是对人用疫苗产品杂质控制的基本考虑，旨在指导疫苗生产和研发过程中对杂质成分的分析、评估并制定相应的控制策略，以尽可能减少或消除杂质对疫苗安全性和有效性的影响，保证疫苗产品质量。该指导原则应基于具体疫苗品种的特点及相关知识参考使用。指导原则主要分为三部分内容，分别为：
1）疫苗杂质来源。阐述了工艺相关杂质和产品相关杂质两大疫苗杂质来源，并提到要重点关注宿主细胞蛋白和核酸、所用生物/化学材料的残留物以及包材相容性研究。
2）疫苗杂质控制的原则及策略。疫苗杂质控制应基于“质量源于设计”的原则，对疫苗中杂质进行风险评估、全过程控制和全生命周期管理，并列举了不同类型疫苗杂质的控制要点（如下图所示）。同时在文中提到有机溶剂的使用应符合“残留溶剂测定法”（通则0861）以及参照“分析方法验证指导原则”（指导原则9101）对检测方法进行验证，并重点关注方法的专属性和灵敏度。
3）变更事项对疫苗杂质控制的影响。应定期评估上市疫苗的生产工艺性能和杂质控制策略的有效性，持续优化产品杂质控制策略，如发生变更应参照相关要求开展变更前后的可比性研究等。
指导原则9403 全文可概括如下方表格所示：
疫苗接种每年可拯救数百万人的生命，其通过与身体的天然防御系统协同作用来建立保护网，从而降低感染疾病的风险。据统计迄今拥有的疫苗可以预防20多种危及生命的疾病，帮助所有年龄段的人活得更长、更健康。目前，疫苗接种每年可防止350万至500万人死于白喉、破伤风、百日咳、流感和麻疹等疾病。疫苗接种是初级卫生保健的一个关键组成部分，也是一项无可争议的人权。它也是钱能买到的最好的健康投资之一。疫苗对预防和控制传染病暴发至关重要，疫苗支撑着全球卫生安全，并将成为抗击抗微生物药物耐药性斗争的重要工具。（摘自who凯时国际官网）
然而直到今天，全球疫苗安全事件仍层出不穷。不规范的管理、不合法的添加、不合规的质量控制都是疫苗安全事件频发的原因，进而导致疫苗这一本用于预防/治疗疾病的工具却成为了加速疾病和死亡的利器。在疫苗的质量控制中，杂质的分析和控制至关重要，疫苗中杂质种类繁杂，来源多样，同时在指导原则9403中强调了要重点关注分析方法的专属性和灵敏度，这使得杂质分析难度进一步提升。岛津于2017年起先后与权威机构和知名疫苗企业开展合作，有着非常丰富的经验和专业的团队，在本篇中小编将和您分享岛津的疫苗杂质分析方案，助力广大用户应对新规发布及实施。
01液相色谱法检测疫苗中四种常见防腐剂残留
● 分析条件
分析仪器：岛津超高效液相色谱仪lc-40
色谱柱：shimadzu shim-pack gist 100 mm x 2.1 mm i.d., 2.0 μm; p/n: 227-3001-04; 岛津（上海）实验器材有限公司
流动相：a-水，b-乙腈
流速：0.4 ml/min
柱温：40 ℃
进样体积：5 μl
洗脱方式：梯度洗脱，b相初始浓度为10%。时间程序见表1。
表1：梯度洗脱时间程序
● 专属性及加标回收实验
图1：对照品（0.5 ppm）和空白溶剂270 nm和220 nm色谱图
表2：样品加标回收率（n=3）
注：n.d.表示未检出
结果显示，方法专属性良好，符合9403要求，且加标回收率在96.8~101.30%之间，rsd在0.05~0.28%之间，方法可靠，可为疫苗中防腐剂残留分析提供参考。
02lcmsms检测疫苗中卡那霉素残留
生物制品中卡那霉素的检测常用免疫法，但前处理复杂、灵敏度和专一性受限；lcmsms方法前处理简单、专一性强、灵敏度高、分析速度快，因此本应用采用lcmsms方法检测卡那霉素。
● 分析条件
分析仪器：岛津超高效液相色谱仪lc-40与三重四极杆质谱仪lcms-8045联用系统
色谱柱：shimadzu shim-pack gist amide 150 mm x 2.1 mm i.d., 3.0 μm; p/n: 227-30818-06; 岛津（上海）实验器材有限公司
流动相：a-250 mm甲酸铵 0.1% 甲酸水溶液，b-乙腈
流速：0.8 ml/min
柱温：50 ℃
进样体积：10 μl
洗脱方式：梯度洗脱，b相初始浓度为75%。时间程序见表3。
表3：梯度洗脱时间程序
● 专属性及加标回收实验
图2：对照品（0.5 ppm）和空白溶剂270 nm和220 nm色谱图
表4：样品加标回收率（n=3）
注：n.d.表示未检出
结果显示，方法专属性良好，符合9403要求，且加标回收率在90.10~101.50%之间，rsd在0.65~2.38%之间，方法可靠，可为疫苗中抗生素残留分析提供参考。
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1 从生产到质量评价——疫苗行业整体凯时国际的解决方案
2 液相色谱法检测疫苗中四种常见防腐剂残留
3 lcmsms检测疫苗中卡那霉素残留
4 icpe-9820同时定量某疫苗中的铝佐剂和硫柳汞
5 aggregates sizer 在疫苗聚集体评价系统中的应用
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